對(duì)于單細(xì)胞懸液的制備和其單細(xì)胞的測(cè)序,通常我們都會(huì)選擇應(yīng)用專(zhuān)用的單細(xì)胞懸液制備儀來(lái)進(jìn)行樣品細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)操作。
單細(xì)胞制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細(xì)胞懸液制備設(shè)備,應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測(cè)序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn),具有起始組織量小,時(shí)間短,細(xì)胞得率高,細(xì)胞活性高的特點(diǎn)。采用國(guó)際DIN方法設(shè)計(jì),低噪音,使用方便,性能穩(wěn)定,帶加熱功能,對(duì)樣品的消化處理過(guò)程始終處在恒溫狀態(tài)。
此次應(yīng)用單細(xì)胞制備儀的實(shí)驗(yàn)?zāi)康木驮谟趯?duì)小鼠的動(dòng)物組織肝、腎、脾單細(xì)的胞懸液制備,同時(shí)在實(shí)驗(yàn)前還需準(zhǔn)備一些相配適用的研磨套裝管、濾管、移液槍、培養(yǎng)皿、鑷子、手術(shù)刀、PBS液、凈信消化酶、終止液等器具耗材試劑的應(yīng)用。
制備單細(xì)胞懸液的操作步驟:
1、開(kāi)機(jī)預(yù)熱,打開(kāi)加熱模塊1,加熱模塊2
2、取活體組織后,放入PBS液中去紅,然后取樣品
3、把消化酶用移液器加入研磨套裝管中,將加滿(mǎn)消化酶的離心管放入預(yù)熱模塊中預(yù)熱若干分鐘
4、將處理好的組織用鑷子轉(zhuǎn)移到加滿(mǎn)消化酶的離心管中
5、將裝滿(mǎn)消化酶和組織的離心管放置到加熱板中,選擇25分鐘程序,開(kāi)始運(yùn)行
6、程序結(jié)束取出離心管,將消化好的組織液轉(zhuǎn)移到過(guò)濾管中,即得到一管單細(xì)胞懸液
肝臟組織
脾臟組織
腎臟組織
應(yīng)用單細(xì)胞懸液制備儀不但對(duì)樣品組織的利用率高、單細(xì)胞產(chǎn)出高,且單細(xì)胞化過(guò)程高效。在針對(duì)組織單細(xì)胞測(cè)序時(shí),可快速完成單細(xì)胞化處理,獲得高產(chǎn)且活率在85%以上的單細(xì)胞;在針對(duì)臨床穿刺樣本,可使組織的利用率達(dá)到百分之100,細(xì)胞產(chǎn)量可達(dá)10萬(wàn)個(gè)以上v;在針對(duì)不同的樣本選擇不同的程序(6組預(yù)設(shè)程序),處理樣品量可達(dá)4*2ml/6*2ml/8*2ml;在針對(duì)原細(xì)胞培養(yǎng)樣本時(shí),可在15min內(nèi)完成組織到單細(xì)胞過(guò)程,降低細(xì)胞逆境時(shí)間,提高細(xì)胞存活率。